1.用无水乙醇配置 0.1mmol/L 的DPPH溶液,避光保存。
2.将2mL测试样品溶液及 2mL DPPH 溶液加入到同一试管中,摇匀,室温下暗处静置 30min 后测定其吸光度A sample,同时测定 2mL DPPH溶液与 2mL 溶剂混合后的吸光度 A0。
3.自由基清除能力的表示:DPPH 清除百分抹射局率=(A0-A sample)和承/A0*100。A0为未加样品时的DPPH在520nm处的吸光度;A sample为加入样品的DPPH在520nm处的吸光度。
由于DPPH是脂溶性的,因而与细胞的水性环境不匹配。现已提出了其替代法,即PTIO自由基清除法。该法可以在水溶液(或pH7.4缓冲溶液)中进行,具有较好的生物相关性